همسانهسازی و بیان ژنهای ممزوجی دومن - a1 آنتیژن حفاظتی با سیلوس آنتراسیس و زیرواحد B سم شیگلا در باکتری E. coli
نویسندگان
چکیده مقاله:
Introduction: Shigella enterotoxin(STxB) is one of the major virulent factors in Shigella dysenteriae type 1 and E. coli O157:H7, which its immunogenicity, adjuvant and delivery characteristic have been proven. Anthrax is a common disease in humans and animals and identifies domain a-1 antibodies of protective antigen(PA) which is 62% of the PA antigens of Bacillus anthracis. Therefore, the purpose of this study was to investigate the expression of recombinant protein domain a-1 protective antigen(PA20) of Bacillus anthracis with Shigella enterotoxin B subunit(STxB) in E. coli. Methods: In this experimental study, primers of pa 20 gene were designed for replacement in stxB-ipaD gene cassette. PCR was performed in order to amplify the fragment and the amplified fragments were cloned into pGEM-Teasy vector. NdeI and SalI restriction enzymes cut pa20 genes and finally the genes pa20 were fused with genes stxB. PET28a (+) Vector containing the gene cassette pa20-stxB was transformed into E. coli strain BL21(DE3) and expression of gene cassette was studied. Results: pa20-stxB fused genes were confirmed in the expression vector pET28a(+) by PCR, enzyme digestion and Sequencing. The produced recombinant proteins were confirmed by SDS-PAGE and Western blotting. Conclusion: The findings of the current study revealed that this antigen can be raised as an anti-cancer and recombinant vaccine candidate against types of Shigella, Escherichia coli and Bacillus anthracis which can be due to such factors as identification of antigen(PA) by antibody PA20, its apoptosis induction properties, property of immunogenicity, adjuvant and delivery of STxB protein and high expression levels of Gb3 in human cancer cells.
منابع مشابه
همسانه سازی و بیان ژن های ممزوجی دومن - a۱ آنتی ژن حفاظتی با سیلوس آنتراسیس و زیرواحد b سم شیگلا در باکتری e. coli
مقدمه: یکی از فاکتورهای بیماری زای اصلی در شیگلا دیسانتری تیپ 1 و e. coli o157:h7، انتروتوکسین شیگلایا (stxb) بوده که خاصیت ایمنی زایی، اجوانتی و دلیوری آن به اثبات رسیده است. سیاه زخم (آنتراکس) یک بیماری مشترک بین انسان و دام بوده و آنتی بادی دومن - a1 آنتی ژن حفاظت کننده باسیلوس آنتراسیس 62 درصد آنتی ژن های مربوط به آنتی ژن حفاظت کننده (pa) باکتری باسیلوس آنتراسیس را شناسایی می کند. هدف ایـن ...
متن کاملهمسانهسازی، امتزاج و بررسی بیان دومن -a1 آنتیژن حفاظتی (PA20) باسیلوس آنتراسیس و N- ترمینال ipaD شیگلا در اشرشیا کلی
زمینه و هدف: جنس شیگلا یکی از عوامل اصلی بیماری اسهال در انسان و باسیلوس آنتراسیس عامل سیاهزخم (یک بیماری مشترک بین انسان و دام) میباشد. یکی از مهمترین فاکتورهای بیماریزایی شیگلا، پروتئین IpaD است. همسانهسازی N ترمینال ژن ipaD به همراه ژن pa20 که دارای نقش ایمنیزایی است، بهعنوان کاندید واکسن نوترکیب میتواند مطرح باشد. در این مطالعه بیان ژن ممزوجی دومن -a1 آنتیژن حفاظتی (PA20) باسیلوس آن...
متن کاملالحاق ژنی زیرواحد b سم کلرا (ctb) با زیرواحد b انتروتوکسین شیگلا دیسانتری تیپ ۱ (stxb) ، همسانه سازی و بیان آن در باکتری e .coli
زمینه و هدف: یکی از مهم ترین فاکتورهای بیماری زای اصلی در شیگلا دیسانتری تیپ 1، انتروتوکسین شیگلا یا stxمی باشد، که از یک زیر واحد سمی آنزیماتیک به نام stxa و یک زیر واحد پنتامریک متصل شونده به رسپتور به نام زیر واحد b یا stxb تشکیل شده است. زیر واحد stxb مسئول اتصال زیر واحد سمی به گیرنده سطح سلولی gb3 بوده و در نهایت باعث ورود سم به درون سلول و اثرات آن می شود. زیر واحد b سم کلرا (ctb) به عنو...
متن کاملهمسانه سازی و بیان آنتی ژن حفاظتی تغییر یافته باسیلوس آنتراسیس در باکتری e. coli
زمینه و هدف: سیاهزخم یک بیماری مشترک بین انسان و دام است. عامل این بیماری باکتری باسیلوس آنتراسیس میباشد. آنتی ژن حفاظتی تغییر یافته باسیلوس آنتراسیس برای درمان و واکسن قابل استفاده می باشد. هدف این مطالعه بیان آنتی ژن حفاظتی تغییر یافته باسیلوس آنتراسیس در باکتریe. coli میباشد. مواد و روش ها: قطعات ژنی مورد نظر از پلاسمید pxoi تکثیر و با عمل soeiong pcr قطعه بدست آمده در کلونینگ وکتور ...
متن کاملکلون، امتزاج و بیان نوترکیب ناحیه 4 آنتیژن حفاظت کننده باسیلوس آنتراسیس با زیرواحد B کلرا توکسین در باکتری اشرشیاکلی
زمینه و هدف: ترکیب یا اتصال ژنتیکی آنتی ژن ها با زیر واحد B کلرا توکسین =cholera toxin B) (ctB پاسخ آنتیبادی موکوسی قوی ای را ایجاد میکند. هدف از این مطالعه اتصال ctB به ژن کد کننده ناحیه 4 آنتی ژن حفاظت کننده (Protective antigen Domain 4=PaD4) به منظور بیان پروتئین کایمریک به عنوان کاندیدا واکسن علیه بیماری سیاه زخم می باشد. روش بررسی: در این تحقیق تجربی آزمایشگاهی واکنش PCR با پرایمرهای ا...
متن کاملهمسانهسازی و بیان ناحیه اتصالی نوروتوکسین نوع B باکتری کلستریدیوم بوتولینوم در باکتری E. coli
Backgrounds & Aims: Botulism is caused by botulinum toxin. The best way to avoid the neurotoxin syndrome caused by BONT/B is to use recombinant vaccine made of BONT/B binding domain because binding domain has sufficient epitops to stimulate immune response. Materials & Methods: Initially BONT/B binding domain gene sequence were obtained from GenBank. Then the primers were designed. PCR react...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 22 شماره 6
صفحات 1702- 1711
تاریخ انتشار 2015-02
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023